Síntesis de neoglicanos a partir de albúmina sérica bovina y oligosacáridos de quitosano para el análisis de glicoepítopes asociados al reconocimiento bacteriano

Abstract

En los últimos años la falta de regulación en el uso de antibióticos ha contribuido a la resistencia bacteriana. Esto ha llevado a la búsqueda de alternativas profilácticas para su prevención y dentro de éstas, la terapia de anti-adherencia ha generado resultados prometedores. La terapia se basa en la utilización de moléculas con estructura análoga a las que participan en el reconocimiento bacteriano, lo que impide (por competencia) la unión de la bacteria con el hospedero y consecuentemente previene la infección. El objetivo fue sintetizar neoglicanos con la capacidad de interferir en el reconocimiento biológico. Se llevó a cabo la síntesis de neoglicanos por medio de la reacción de Maillard usando albúmina sérica bovina (BSA) y oligosacáridos de quitosano (sin ultrafiltrar, ultrafiltrados y ultrafiltrados re-acetilados) en proporción 1:2 (p/p) y temperatura de 50, 60 y 70 °C por 30 minutos. La caracterización de neoglicanos se realizó por medio de electroforesis SDS-PAGE, cuantificación de grupos amino libres, espectroscopía de infrarrojo con transformada de Fourier (FT-IR) y patrones de emisión de fluorescencia intrínseca. Además, se realizaron ensayos de reconocimiento con la lectina de germen de trigo (WGA, por sus siglas en inglés) específica para residuos de N-acetilglucosamina. La caracterización permitió evidenciar la conjugación de oligosacáridos de quitosano con BSA. La mayor glicación se presentó en los neoglicanos obtenidos a 70°C, en los tres grupos de neoglicanos. Los ensayos con la lectina WGA mostraron que los neoglicanos mayormente reconocidos en los tres grupos fueron aquellos obtenidos a 70 °C y sintetizados a partir de oligosacáridos ultrafiltrados y posteriormente re-acetilados. En los ensayos con las cepas de E. coli K88+ y E. coli K88 ac se observó mayor reconocimiento con neoglicano del grupo con oligosacáridos sin ultrafiltrar obtenido a 50 °C, seguidos por el neoglicano con oligosacáridos ultrafiltrados y re-acetilados obtenidos a 70 °C por la cepa E. coli K88+, y neoglicanos obtenidos a 70 °C con oligosacáridos sin ultrafiltrar por la cepa E. coli K88 ac. Concluyendo con esto, que, los neoglicanos sintetizados tienen la capacidad de ser reconocidos por cepas de contienen adhesinas de reconocimiento hacia Nacetilglucosamina y glucosamina, esto abre la posibilidad de ampliar la variedad de cepas que se pueden incluir para la terapia de anti-adherencia.